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  • 腺病毒包装


    一、 实验原理 


    二、应用简介

    腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90 nm的病毒颗粒,为线状双链dna分子,约含35000 bp,两端各有长约100 bp的反向重复序列。

    实验平台的腺病毒为5型血清型腺病毒,缺失了腺病毒的早期表达基因序列e1区和e3区。e1是腺病毒复制所必须的,e1的缺失使其不能自身复制,只能依靠包装细胞如hek293细胞提供的反式互补进行复制扩增,以此保证腺病毒的安全性。e3基因表达的蛋白能对抗宿主的抗病毒防御系统,e3区的去除能减少宿主的体内免疫反应。

    腺病毒包装采用的是最新的admax系统,通过cre-loxp重组酶,使共转染到hek293细胞中的腺病毒载体穿梭质粒和骨架质粒(腺病毒基因组质粒)在重组酶的作用下产生重组腺病毒,获得的病毒滴度更高,其病毒滴度可以达到1×10^12pfu/ml 。

    腺病毒载体有cmv、mcmv、cag、pgk、ubc、ef1a、等多种启动子可供选择;而且还有egfp、zsgreen、tdtomato、mcherry、eyfp等多种荧光标记蛋白可供选择。


    三、实验方法


    四、样本送检要求

    交付标准:

    滴度:>108tu/ml

    规格:1ml

    赠送阴性对照病毒规格:0.2ml(>108tu/ml)


    五、案例展示

     

    过表达腺病毒感染原代大鼠神经元细胞图片


    六、常见问题


    七、服务流程

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